Каталитическая РНК

Рибозим (сокращение от «рибонуклеиновая кислота» и «энзим»), также называемая ферментативной РНК или каталитической РНК — это молекула РНК, обладающая каталитическим действием. Многие рибозимы естественного происхождения катализируют расщепление самих себя или других молекул РНК, кроме того образование пептидной связи в белках происходит при помощи рРНК рибосомы. В рамках исследований, посвященных происхождению жизни, удалось создать искусственные рибозимы типа РНК-полимеразы, способные при определенных условиях катализировать свою собственную сборку ^[1]. Лабораторные образцы, однако, показали невысокую каталитическую способность: они успевают собрать в цепочку не более 14 нуклеотидов за 24 часа, по истечении которых они разлагаются за счет гидролиза фосфодиэфирных связей.

Открытие

До открытия рибозимов ферменты — белки, обладающие каталитическими свойствами^[2], — считались единственными органическими катализаторами. В 1967 году, Карл Вёзе, Френсис Крик и Лесли Оргель впервые выдвинули предположение, что РНК может быть катализатором. Это предположение основывалось на том, что РНК может образовывать сложную вторичную структуру^[3].

Рибозимы были обнаружены в 1980-х годах Томасом Чеком, изучавшим сплайсинг РНК у реснитчатого простейшего Tetrahymena thermophila, и Сидни Альтманом, работавшим с бактериальной рибонуклеазой P.

Рибозимы нашлись в интроне, который сам отщеплялся от собранной РНК, а также в РНК-субъединице комплекса рибонуклеазы P, участвующей в обработке пре-тРНК.

В 1989 Чек и Альтман получили Нобелевскую премию по химии за «обнаружение каталитических свойств РНК»^[4].

Термин рибозим был введен Келли Крюгер и др. в статье, опубликованной в журнале Cell в 1982 году.

Действие

Несмотря на то, что большинство рибозимов достаточно редко встречаются в клетках, иногда они очень важны для их существования. Например, активная часть рибосомы — молекулярной машины, осуществляющей трансляцию белков из РНК — является рибозимом.

В качестве кофакторов некоторые рибозимы часто содержат двухвалентные ионы металлов, например, Mg²⁺.

То обстоятельство, что РНК может содержать наследственную информацию, позволило Уолтеру Гилберту выдвинуть предположение, что в древности РНК использовалась как в качестве генетического материала, так и в качестве катализаторов и структурных компонентов клетки, а впоследствии эти роли были перераспределены между ДНК и белками. Эта гипотеза сейчас известна как Гипотеза РНК-мира.

Если РНК были первыми молекулярными машинами, использовавшимися в ранних живых клетках, то рибозимы, существующие сегодня (например, аппарат рибосомы), могут считаться живыми ископаемыми — образцами живых существ, состоящих из нуклеиновых кислот.

Недавние исследования свертывания прионов показывают, что РНК может катализировать свертывание белка в патологические конфигурации подобно ферментам-шаперонам^[5].

Известные рибозимы

Естественные рибозимы

В природе обнаружены следующие рибозимы:

• Рибонуклеаза Р;
• Интроны групп I и II;
• Свинцовый рибозим (leadzyme) — обнаружено несколько естественных образцов, хотя впервые был создан в лаборатории;
• Рибозим, содержащий шпильку;
• Рибозим типа hammerhead;
• Рибозим вируса дельта-гепатита;
• Рибозим
• Рибозим глюкозамин-синтазы (рибозим, активируемый глюкозамин-6-фосфатом).

Синтетические рибозимы

После обнаружения естественных рибозимов начались и исследования новых синтетических рибозимов, созданных в пробирке. Например, получены саморасщепляющиеся РНК, обладающие высокой каталитической активностью.

Тан и Брейкер ^[6] выделили саморасщепляющиеся РНК путем отбора фрагментов из РНК, сформированных случайным образом. Среди синтетических рибозимов есть как обладающие уникальной структурой, не встречающейся или не обнаруженной в живой природе, как и другие, весьма схожие с естественным рибозимом-молотком.

Одна методик обнаружения синтетических рибозимов — эволюционный метод. Этот подход полагается на двойственную природу РНК, которая является как катализатором, так и информационной цепочкой. За счет такой двойственности довольно просто создать большие разнообразия РНК-катализаторов при помощи ферментов типа полимераз. Полученные рибозимы подвергаются мутациям путем обратной транскрипции при помощи обратных транскриптаз с образованием фрагментов кДНК в процессе мутагенной полимеразной цепной реакции.

Смотри также

• Дезоксирибозимы
• Монстр Шпигельмана

Ссылки

1. ↑ Johnston W, Unrau P, Lawrence M, Glasner M, Bartel D (2001). "RNA-catalyzed RNA polymerization: accurate and general RNA-templated primer extension". Science 292 (5520): 1319-25. PMID 11358999.
2. ↑ Enzyme definition Dictionary.com Accessed 6 April 2007
3. ↑ Carl Woese, The Genetic Code (New York: Harper and Row, 1967).
4. ↑ Нобелевская премия по химии в 1989 присуждена Томасу Чеку и Сидни Альтману «за обнаружение каталитических свойств РНК».
5. ↑ «Prion protein conversion in vitro» by S. Supattapone (2004) in Journal of Molecular Medicine Volume 82, pages 348—356. Шаблон:Entrez Pubmed
6. ↑ Jin Tang and Ronald R. Breaker (1997). "Structural diversity of self-cleaving ribozymes". Proceedings of the National Academy of Sciences 97 (11): 5784-5789. PMID 10823936.

Внешние ссылки

• Ribozyme structures and mechanisms
• De novo synthesis and development of an RNA enzyme
• Directed evolution of nucleic acid enzymes.